血清视黄醇结合蛋白4对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌组织磷脂酰肌醇3激酶的影响(2)
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1资料与方法
1.1一般资料
1.1.1实验动物与分组健康SPF级雄性6周龄Wistar大鼠30只，正常普通饲料其成分以提供热量计算，蛋白质占20.93%、脂肪占16.67%、碳水化合物占62.40%。高脂高糖饲料为在普通饲料的配方中添加20%蔗糖、10%熟猪油、2.5%胆固醇、1%胆酸盐。将30只Wistar大鼠随机分成正常对照组(NC组)(n=10)及模型组(n=20)。实验大鼠每笼5只，正常黑夜交替，自由饮食及饮水。适应性喂养3 d后，NC组给普通饲料，模型组喂以高脂高糖饲料。喂养8周，取血检测空腹血糖及胰岛素，计算胰岛素抵抗指数(Home-IR)。证实造模成功后，模型组随机分成胰岛素抵抗(IR)、吡格列酮治疗(IR+PIO)两组，各10只。从第9周开始IR和IR+PIO组继续高脂高糖饮食喂养，IR+PIO组同时给吡格列酮20 mg/(kg•d)灌胃，IR和NC组以生理盐水灌胃。NC组继续给普通饮食，三组继续喂养8周。
1.1.2试剂胰岛素放免试剂盒由原子高科技股份有限公司提供；大鼠RBP4 ELISA试剂盒由武汉中美科技有限公司提供。
1.1.3仪器美国罗氏诊断公司提供的优越血糖仪Advantage Ⅱ；美国Beckman公司提供X的CTX型全自动生化分析仪；日本OLYMPUS-CH30显微镜；HPIAS-1000型全自动图像分析系统。
1.2方法
1.2.1一般情况及生化指标的检测在16周末测定体重(BW)，最后一次灌胃后，禁食12 h，水合氯醛腹腔麻醉(300 mg/kg)，处死全部大鼠，心脏采血。全自动生化仪检测血清TG、TC、HDL-C、LDL-C；罗氏血糖仪测血糖(FPG)，放射免疫法测胰岛素(FINS)。胰岛素敏感指数(ISI)的计算按照ISI＝In[1/(FPG×FINS)]。取肠系膜、附睾、反折腹膜脂肪称重，计算内脏脂肪重量及其与体重的比值。
1.2.2双抗体夹心酶标分析法检测RBP4水平心脏采血 ......
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